注意這些細節(jié),更好的操作ELISA檢測試劑盒!
ELISA檢測試劑盒在試驗中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。 加標本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。
可用作ELISA檢測試劑盒測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。
ELISA檢測試劑盒操作注意事項:
(1).實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
(2).ELISA檢測試劑盒應(yīng)按標簽說明書儲存,ELISA檢測試劑盒使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
(3).使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
(4).不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
(5).洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
(6).使用干凈的塑料容器配置洗滌液。ELISA檢測試劑盒使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
(7).加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
(8).按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
(9).底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。ELISA檢測試劑盒實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
ELISA檢測試劑盒運輸條件:2-8℃低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸。
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