漲知識(shí)!西格瑪試劑的樣本處理方法
西格瑪試劑發(fā)展迅速,應(yīng)用范圍也越來(lái)越廣泛。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,我們需按照產(chǎn)品的說(shuō)明一步步進(jìn)行操作,此外,還要考慮到存在的危險(xiǎn)、實(shí)驗(yàn)對(duì)我們操作人員造成的危害、實(shí)驗(yàn)室工程菌外流對(duì)環(huán)境有無(wú)影響,只有考慮到這些問(wèn)題對(duì)我們的科研工作者有來(lái)說(shuō)才是安全的。才能消除安全隱患,對(duì)我們的身心健康帶來(lái)保障。
做實(shí)驗(yàn)本身就是一個(gè)非常謹(jǐn)慎的事情,所以在收集樣本之前都需要設(shè)置一個(gè)非常完整的計(jì)劃,要清楚自己所需要檢測(cè)的成分是不是夠穩(wěn)定,然后把當(dāng)前檢測(cè)的樣本收集起來(lái),并進(jìn)行存儲(chǔ)好方便以后使用。而且存儲(chǔ)環(huán)境要在四攝氏度環(huán)境之中,至于第二天需要再一次進(jìn)行檢查的樣本,要提前分裝好,冰凍在-20攝氏度環(huán)境里面留著備用,當(dāng)然如果有條件的話,存儲(chǔ)穩(wěn)定是-70攝氏度,不要讓它們發(fā)生反復(fù)凍融的情況。那么,西格瑪試劑的樣本處理方法有哪些呢?下面為大家介紹。
1、血清
把室溫血液放置十到二十分鐘,等他們自然凝固以后,再離心二十分鐘,就可以把上面的血清收集起來(lái)了,保持血清的時(shí)候如果發(fā)現(xiàn)里面有沉淀的話,還需要重新進(jìn)行離心才可以。
2、細(xì)胞培養(yǎng)上清
如果有分泌性的成份需要進(jìn)行檢查的話,一定要使用無(wú)菌管去收集。收集方法先離心二十分鐘再動(dòng)手。
3、血漿
應(yīng)按照分子生物學(xué)試劑盒的標(biāo)本要求去挑選肝素、EDTA、或者是檸檬酸鈉當(dāng)做抗凝劑,先把這些東西混合十到二十分鐘,然后離心二十分鐘就能夠收集血漿了,和血清一樣,一旦在保持的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了沉淀物質(zhì),還需要再一次進(jìn)行離心才行。
4、組織標(biāo)本
處理的時(shí)候需要先把標(biāo)本切割下來(lái),然后稱他們的重量。并放入一定量的PH7.4PBS。然后使用液氮迅速把標(biāo)本進(jìn)行冷凍保存,以便后期使用。當(dāng)組織標(biāo)本融化以后就可以保持到二到八攝氏度了,然后在放入組織蛋白萃取試劑或者是PBS,采取勻漿器或者是手工的方法把組織標(biāo)本給勻漿化就行了。
操作中有著朋友們所注意不到的幾個(gè)細(xì)節(jié)。
1、注意每種試劑使用前均須搖勻。
2、洗滌工作液在使用前也需回溫。
3、在給試劑編號(hào)時(shí),要將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
4、在洗板中,拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破。這些就是西格瑪試劑操作中的幾個(gè)可能是您注意不到的細(xì)節(jié)部分。
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