培養(yǎng)基是供微生物生長(zhǎng)、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。由于微生物具有不同的營(yíng)養(yǎng)類型,對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求也各不相同,加之研究的目的不同,所以種類很多,使用的原料也各有差異,但從營(yíng)養(yǎng)角度分析,一般含有微生物所需的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)素以及水分等。另外,還應(yīng)具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。為了達(dá)到特定要求的研究,需要進(jìn)行配制和滅菌,那么該如何配制與滅菌呢?
可按處方配制,也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基。
在制備時(shí),應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的或單獨(dú)配方組分進(jìn)行配制。應(yīng)附有處方和使用說(shuō)明,配制時(shí)應(yīng)按使用說(shuō)明上的要求操作以確保質(zhì)量符合要求,不得使用結(jié)塊或顏色發(fā)生改變的。應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下儲(chǔ)存,如低溫、干燥和避光,所有的容器應(yīng)密封,尤其是盛放的容器。商品化的除了應(yīng)附有處方和使用說(shuō)明外,還應(yīng)注明有效期、貯存條件、適用性檢查試驗(yàn)的質(zhì)控菌和用途。
為保證質(zhì)量的穩(wěn)定可靠,各培養(yǎng)基或各配方組分應(yīng)準(zhǔn)確稱量,配制常用的溶劑是純化水,特殊情況下,可能需要用去離子水和蒸餾水。應(yīng)記錄各稱量物的重量和水的使用量。配制所用容器和配套器具應(yīng)潔凈,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來(lái)物質(zhì)的殘留。
若采用不適當(dāng)?shù)募訜岷蜏缇鷹l件,有可能引起顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH的改變。因此,應(yīng)采用驗(yàn)證的滅菌程序滅菌,滅菌方法和條件,應(yīng)通過(guò)無(wú)菌性試驗(yàn)和促生長(zhǎng)試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。此外,對(duì)高壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也要加以驗(yàn)證,以保證在一定裝載方式下的正常熱分布。應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的特性,進(jìn)行滅菌程序驗(yàn)證。
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的進(jìn)步已導(dǎo)致重組蛋白產(chǎn)品生產(chǎn)的大幅提高,這主要?dú)w功于強(qiáng)大的載體設(shè)計(jì)和宿主細(xì)胞工程方法。但是,還需要對(duì)培養(yǎng)基開發(fā)領(lǐng)域進(jìn)行探索和試驗(yàn),以及對(duì)它們?nèi)绾斡绊戇^(guò)程和產(chǎn)品的理解。合理設(shè)計(jì)將有助于我們了解細(xì)胞代謝組學(xué)及其調(diào)節(jié)作用,以開發(fā)具有所需產(chǎn)品濃度和治療活性的重組蛋白產(chǎn)品。
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