elisa試劑盒的操作需要引起注意的細節(jié)

　　elisa試劑盒的操作需要引起注意的細節(jié)
　　elisa試劑盒以固相載體吸附技術和免疫酶技術相結合建立的一種檢測方法，其操作簡便，無需特殊設備，并具有高度的敏感性和準確性，所以受到大家的廣泛重視，以致在較短時間內(nèi)，于國內(nèi)外均取得了較快的進展。
　　elisa試劑盒標準曲線線性不佳的原因：
　　1、原因：溫育位置避光不好或受到氣流干擾。
　　解決辦法：請確認溫育位置既不透光也不透風(如抽屜內(nèi))。
　　2、原因：操作時間拖太久。
　　解決辦法：請在方法熟練后再進行操作。
　　3、原因：微孔間相互污染。
　　解決辦法：加樣品時，請小心勿濺出微孔外，以免造成其它微孔的污染。
　　4、原因：標準品或酶標記物所加入的量不一致。
　　解決辦法：請使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。
　　5、原因：添加樣品或elisa試劑盒的操作方法不正確。
　　解決辦法：加樣品或elisa試劑盒時，吸頭請勿接觸微孔。
　　6、原因：洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進行下一步驟)。
　　解決辦法：請隨時監(jiān)控洗板機洗板過程，洗完后立即進行下一步驟。
　　elisa試劑盒操作中應注意以下四個方面：
　　1．隨著病情的進展或由其他因素影響，某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動，因此有必要對標本進行預處理，例如對血清標本作適當稀釋，或離心分離血脂等。間接法測定中，標本適當稀釋還可降低非特異性反應。
　　2．加樣一般使用加液器，在中一般有4次加樣：加標本、加酶結合物、加底物和加終止液。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶結合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
　　3．在成批手工檢測中，還應注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異，使抗原抗體反應和酶促反應時間不一致，對競爭法及定量檢測影響很大，不注意可能會導致elisa試劑盒錯誤結果或定量不準。
　　4．洗滌是elisa試劑盒操作過程中決定實驗成敗的一個關鍵步驟。目的是除去未結合的免疫反應物，終止抗原抗體反應，除去標本中與反應無關的成分、游離的酶標物以及反應過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。