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小鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒說明書

簡要描述:

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更新時間:2019-08-22 17:23:29

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ELISA 試劑盒使用手冊

1.  用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。

2.  每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及 2N H2SO4 。測量時先用此孔調(diào) OD 值至零。

3.  為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。

4.  未使用完的酶標板或者試劑,請于 2-8 保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。

5.  建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準確性。

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少 0.3ml 注入孔內(nèi),浸泡 1-2 分鐘。根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。

自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

計算

以標準物的濃度為橫坐標(對數(shù)坐標), OD 值為縱坐標(普通坐標),在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的 OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

注意事項

1.  當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。

2.  洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。

3.  一次加樣時間 zui好控制在 5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4.  請每次測定的同時做標準曲線, zui好做復孔。

5.  如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請最后乘以稀釋倍數(shù)。

6.  在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。

7.  底物請避光保存。

8.  不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

 

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