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大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒說明書

簡要描述:

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更新時間:2019-08-22 17:23:29

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貨號:WTA5727,產品名稱:大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒說明書,英文名稱:Rat soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRβ ELISA kit,品牌:進口原裝/國產

 

 

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     ELISA 試驗 以靈敏度較高、特異性較好的特點得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。在操作過程中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給實驗師帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。        下面分析 Elisa 試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法

    1 選擇試劑 選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡 30-60 分鐘。

    2 加樣   可能原因: 1 )血清或血漿標本分離不好即進行加樣; 2 )手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長 ( 特別是室內溫度較高時 ) ; 3 )加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。解決辦法: 1 ) 標本為血清: zui 將血液先自然存放 1-2 小時后,再用 3000rmp 離心 15 分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合 5-10 次,放置一段時間后, 3000rpm 離心 15 分鐘;若在幾天內檢測,可放在 2-8 冰箱中,若要貯存,則置于 -20 的低溫冰箱內。 2) 加樣后及時放入孵箱。 3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 4) 如果采用 AT 或其他全自動加樣, zui 選擇 FAME 或其他后處理儀器加酶試劑。 5) 標本較多時,請分批操作。

    3   孵育   可能原因: 1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗徹底; 2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。解決辦法: 1) 貼封片或加蓋; 2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。

    4 洗板   可能原因: 1) 采用手工洗板 , 孔與孔之間液體交叉。 2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不徹底;洗板針堵塞,抽吸不完全;洗板不暢,導致洗板效果差。 3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法: 1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后 zui 在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干; 2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。

    5 顯色   可能原因: 1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑; 2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法: 1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的 TMB 顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流; 3) A B 液應避免接觸金屬器械。

    6 終止   可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。

    7 讀板   如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。   所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸 ; 盡可能實現(xiàn) ELISA 檢測標準自動化,有效提高檢測質量。在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F(xiàn)在國內已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn) ELISA 標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。

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